본 발명은 CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas9 시스템을 활용하여 개 모델에서 대표적인 종양 억제 유전자인 TP53 유전자를 특이적으로 표적하는 기술과 이를 적용하여 구축한 TP53 넉아웃 (knock-out) 개 세포주 및 이를 종양 연구에 활용하는 기술에 관한 것이다. 본 발명의 가이드 RNA (gRNA)는 개의 TP53 유전자만을 특이적으로 표적할 수 있는바, 이러한 특정 gRNA를 CRISPR/Cas9 시스템에 도입하는 경우 오프-타겟 효과(off-target effect) 없이 개의 TP53 유전자를 특이적으로 넉아웃(knock-out) 시킬 수 있다. 따라서, 개의 TP53 유전자를 특이적으로 표적하는 gRNA가 적용된 CRISPR/Cas9 시스템은 TP53 신호체계 불활성화와 관련된 다양한 종양 관련 연구를 위한 개 세포 모델과 동물모델을 제작하는데 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 개 TP53 유전자-특이적 CRISPR/Cas9 시스템으로 구축한 TP53 넉아웃 세포는 개의 종양과 관련된 다양한 종양유전자의 종양 생성 및 악성화 기전연구를 위한 연구 모델과 이와 관련한 항암제 테스트 모델로 활용할 수 있다.
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